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高電壓電泳儀在操作時(shí)要引起注意的一些事項(xiàng)

更新時(shí)間:2020-09-03      點(diǎn)擊次數(shù):2094
   高電壓電泳儀在操作時(shí)要引起注意的一些事項(xiàng)
  高電壓電泳儀是實(shí)現(xiàn)電泳分析的儀器,一般由電源、電泳槽、檢測(cè)單元等組成。它裝有定時(shí)器,恒壓或恒流輸出,以及一個(gè)全新的暫停/繼續(xù)功能,能使您在運(yùn)行時(shí)改變已編程的參數(shù)而無須重新設(shè)定時(shí)間。它的光滑表面,橡膠按鍵以及綠色透明機(jī)箱的設(shè)計(jì),與其操作簡(jiǎn)便的特點(diǎn)一樣。
  電泳技術(shù)是分子生物學(xué)研究*的重要分析手段。電泳一般分為自由界面電泳和區(qū)帶電泳兩大類,自由界面電泳不需支持物,如等電聚焦電泳、等速電泳、密度梯度電泳及顯微電泳等,這類電泳目前已很少使用。而區(qū)帶電泳則需用各種類型的物質(zhì)作為支持物,常用的支持物有濾紙、醋酸纖維薄膜、非凝膠性支持物、凝膠性支持物及硅膠-G薄層等,分子生物學(xué)領(lǐng)域中常用的是瓊脂糖凝膠電泳。所謂電泳,是指帶電粒子在電場(chǎng)中的運(yùn)動(dòng),不同物質(zhì)由于所帶電荷及分子量的不同,因此在電場(chǎng)中運(yùn)動(dòng)速度不同,根據(jù)這一特征,應(yīng)用電泳法便可以對(duì)不同物質(zhì)進(jìn)行定性或定量分析,或?qū)⒁欢ɑ旌衔镞M(jìn)行組份分析或單個(gè)組份提取制備,這在臨床檢驗(yàn)或?qū)嶒?yàn)研究中具有重要的意義。高電壓電泳儀正是基于上述原理設(shè)計(jì)制造的。
  它對(duì)進(jìn)樣技術(shù)要求很高,進(jìn)樣操作事項(xiàng)如下:
  1、進(jìn)樣區(qū)帶越小越好:無論采用何種進(jìn)樣方式,插入樣品溶液的深度一般要少于總長(zhǎng)度的1%~2%,以盡量減少樣品溶液經(jīng)毛細(xì)吸附進(jìn)入而影響進(jìn)樣量的性。樣品管中溶液少為5μL,進(jìn)樣體積為1~50nL。
  2、進(jìn)樣時(shí)間以短為宜:通常進(jìn)樣時(shí)間為0.5~1s,此時(shí)粘附的樣品量相對(duì)于吸入的體積可忽略不計(jì)。雖然電泳的進(jìn)樣時(shí)間可至±0.1s,但由于插入樣品管時(shí)不可避免地會(huì)粘附一些溶液,進(jìn)樣時(shí)間過短會(huì)影響分析的重復(fù)性。
  3、樣品預(yù)濃縮:受總體積的制約,對(duì)于濃度很稀的樣品,高電壓電泳儀不能象HPLC那樣可加大進(jìn)樣量來提高檢測(cè)靈敏度,但可采取一些措施來改善。
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